Serial przedstawia przygody nastolatka Petera Parkera, który po ugryzieniu przez radioaktywnego pająka odkrywa w sobie niezwykłą siłę i niesamowite pajęcze zdolności. Postanawia walczyć z przestępczością jako zamaskowany superbohater,  jednocześnie borykając się z problemami
osobistymi związanymi z byciem nastolatkiem. W pierwszym sezonie mamy do
czynienia głównie z konfrontacjami  Spider-Mana z przeciwnikami znanymi nam z
 kadrów komiksów, są to min: Vulture,  Sandman, Scorpion, Electro, Dr. Magneto, Dr. Octopus i Lizard. W kolejnych sezonach Spider-Man zmuszony jest  stawiać czoło wszelkiego rodzaju magicznym postaciom i stworom.